現如今，隨著科技的發展，細胞保存這一領域取得了進步，諸多生物材料的低溫保存，例如血細胞、干細胞、精子、卵細胞、胚胎、角膜、皮膚、胰島等，隨著低溫保存技術的發展得以實現。在這其中，海藻糖作為低溫保存常用的非滲透性保護劑，實力不容小覷。

低溫保存技術的進步，給細胞保存帶來了哪些實際意義？

血細胞的長期保存解決了臨床上血液供需不平衡的問題；干細胞的保存在**再生障礙性貧血、白血病中能減少抗宿主病的發生率；生殖細胞的保存對再生醫學和輔助生殖影響深遠。

海藻糖的作用原理是什么？

海藻糖作為低溫保存常用的非滲透性保護劑，這類保護劑分子不能進入細胞，但可以提高胞外溶液的溶質濃度，不僅能在細胞外形成高滲，減少胞內冰的形成，還具有較高的玻璃化溫度，易形成玻璃態，一方面避免了低溫對細胞膜蛋白質和脂質的損傷，另一方面將細胞膜的蛋白質分子支撐包裹起來，使之不易變形，**細胞膜融合，降低細胞膜的通透性。

目前研究中，應用含不同濃度海藻糖的保護液，對低溫保存肝*細胞[1]、犬氣管困、卵巢*細胞和宮頸*細胞及小鼠受精卵，均取得了良好的保存效果。胎牛血清( FBS)也有助于細胞的冷凍保存，且在腸道**組織原代細胞、牛成纖維細胞等低溫保存中效果****。

Zheng等用麥管和石英毛細管作為冷凍載體，使用兩種滲透性保護劑EG和DMSO(體積分數為8%、15%)及一種非滲透性保護劑海藻糖(0.5 M)玻璃化保存了人臍靜脈內皮細胞( HUVECs)。結果表明，用1.4 M EG加1.1 M DMSO，并用石英毛細管玻璃化可以得到90%的存活率[2]。

血小板在保存過程中結構和功能會隨著時間延長而發生變化，這些改變統稱為儲存損傷(platelet storage lesion , PSL)。常規的血小板保存條件為22 ℃振蕩保存5d。為了減少血小板的儲存損傷，人們嘗試采用低溫保存方法，低溫保存雖可以延長血小板保存時限，但低溫易致血小板發生活化，使其在輸注到受者體內后失效并很快被**。研究表明，加入海藻糖能**血小板儲存過程中的損傷及減少凋亡的發生[3-4]。

參考文獻

1  BLAKE S，QUINN O，DAVID G，et al.Cryopreservation of hepatocyte(HepG2) cell monolayers: impact of trehalose[J].Cryobiology，2014，69 (2) :281-290.

2  ZHENG Y, ZHAO G, PANHWAR F, et al. Vitreous cryopreservation of human umbilical vein endothelial cells with low concentration of cryoprotective agents for vascular tissue engineering [J]. Tissue engineering Part C, Methods, 2016, 22(10): 964-73.

3  Wang X，Fan Y，Shi R，et al. Quality assessment of platelets stored in a modified platelet additive solution with trehalose at low temperature(10℃)and in vivo effects on rabbit model of thrombocytopenia [J].Platelets，2015，26(1): 72一79.DOI: 10. 3109 /09537104. 2013.872772

4 Landry P，Plante I，Ouellet D L，et al.Existence of a microRNA pathway in anucleate platelets[J].Nat Struct MolBiol，2009，16( 9):961一966. DOI: 10. 1038 /nsmb. 1651